blot

免疫组化和基因检测的区别是什么

免疫组化，是应用免疫学基本原理——抗原抗体反应，即抗原与抗体特异性结合的原理，通过化学反应使标记抗体的显色剂（荧光素、酶、金属离子、同位素）显色来确定组织细胞内抗原（多肽和蛋白质），对其进行定位、定性及相对定量的研究，是蛋白水平的检测。
基因检测是指通过基因芯片等方法对被测者细胞中的DNA分子进行检测，并分析被检测者所含致病基因、疾病易感性基因等情况的一种技术。目前基因检测的方法主要有：荧光定量PCR、基因芯片、液态生物芯片与微流控技术等。
两者是不同的检测手段。

Blot，免疫组化有什么区别

免疫组化利用抗体和抗原之间的结合具有高度的特异性。先将组织或细胞中的某种化学物质提取出来，以此作为抗原或半抗原，通过免疫动物后获得特异性的抗体，再以此抗体去探测组织或细胞中的同类的抗原物质。所以免疫组化在组织定位和定性上比较准确，但是在定量上不够准确。western blot也是利用抗体和抗原之间的结合具有高度的特异性。经过聚丙烯酰胺凝胶电泳分离的蛋白质样品，转移到固相载体上，固相载体以非共价键形式吸附蛋白质，且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原，与对应的抗体起免疫反应，再与酶或同位素标记的第二抗体起反应。western blot因为有内参标定，所以在定量上要更加准确。但是在组织定位上不如免疫组化

电泳液中加入SDS的作用是什么？

如果你是做测量蛋白质相对分子质量大小的话：
聚丙烯酰胺凝胶电泳具有较高分辨率，用它分离、检测蛋白质混合样品，主要是根据各蛋白质组分电泳迁移率的不同。这种差异就蛋白质分子本身而言，主要与其所带电荷的差异以及分子大小不同有关。如果将电荷差异这一因素去除或减小到可以忽略不计的程度，分子在凝胶上迁移率的大小则完全取决于相对分子质量的大小。
十二烷基硫酸钠（SDS）是一种阴离子表面活性剂，当其与蛋白质混合，质量比达到1.4:1时，SDS能破坏蛋白质分子间以及其他物质分子间的非共价键使蛋白质的构象发生变化继而使蛋白质变性解离成单一亚基，从而降低或消除了各种蛋白质分子间的天然电荷差异，形成SDS-蛋白质负离子，这样就使电泳迁移率只取决于分子大小这一因素。据经验得知，当蛋白质的相对分子质量在17000-165000之间时，蛋白质-SDS复合物的电泳迁移率与蛋白质相对分子质量的对数呈线性关系，于是根据标准蛋白质相对分子质量的对数和迁移率所作的标准曲线，可求得未知蛋白质的相对分子质量。

免疫组化中一抗与二抗有什么要求？谢谢！

比如一抗是鼠抗人，二抗必须是×抗鼠的。×表示可以是羊，兔，马等。一抗是单抗，二抗是多抗，是抗一类同种异型的Ig，带有特殊的可产生发光现象的标记。条件允许尽量选择进口，一抗abcam，Santa，CST等值得信赖，二抗的话国产的就行了。源性一抗如果需要做共定位，那么就需要不同源性的且要能够用于人组织的，可以做组化的，二抗建议选择驴抗，这样用处多；如果说是做组织化学，那么一抗源性就无所谓了只要能用于人的组织，二抗相应配套就行。扩展资料：抗体选择没问题，关于二抗你直接购买国产的二抗试剂盒就可以了，如中杉金桥或者博士德的都没问题，里面封闭用的过氧化氢和山羊血清都有的。按照试剂盒说明，一步一步做即可。 免疫荧光，ABC，western blotting一抗应该可以通用，某些抗体的说明书上会给推荐效价，有时会同时给出western blotting 和免疫组化的效价。一点更正：免疫荧光就是一种免疫组化方法！免疫荧光使用的是荧光抗体（荧光一抗为直接法，普通一抗加荧光二抗为间接法）。免疫组化的二抗必须是抗一抗物种的抗原，比如说：做A动物的B蛋白所用的一抗为动物C抗动物A的B蛋白抗体，二抗就应该是动物D抗动物C抗体。如：豚鼠抗大鼠cofilin1一抗，羊抗豚鼠二抗。二抗远比一抗便宜。参考资料来源百度百科——免疫组化

免疫组织化学和western-blot、免疫细胞化学所用的一抗可以通用吗？

组织化学和细胞组织化学所用的一抗是可以通用的。
做免疫组化和western的抗体不一定通用,有的可以用但是稀释度差别很大,有的完全就不推荐使用,还要注意看说明书的。有的是用于WESTERN的，有的是用于石蜡切片的，有的是用于冰冻切片的，都有不同。具体能否通用，最好问厂家的技术支持。
………………
详细资料请参考：on
http://product.bio1000.com/100760/