蛋白纯化系统AKTApurifier
分辨率其实是跟检测器相关的,高分辨率的仪器能够体现出较小的峰,峰型更接近实际。其实这两款区别主要体现在:prime是单隔膜泵,在耐压、流速精度等都比purifier的双柱塞泵有较大差别,另外prime的梯度是靠比例阀实现的,梯度精度相对较差。prime的工作站只能监控数据和分析,不能实现自动控制,自动化程度太低,效率低。因此对于对效率、精度要求不高的可以选用prime,毕竟价格低。另外这两年国产的纯化系统也在崛起,质量已经和进口相当,对经费预算较少,但系统要求高的可以选择。
蛋白质柱纯化过程中用的主要仪器有哪些
柱纯化是蛋白纯化最高效的方法。
首先我们需要一个带有特定标签的柱子,也可能是阴离子柱,阳离子柱或者层析柱。
然后要一台纯化仪,我们实验室的是bio-red,其实最好的纯化仪是AKTA的,很耐折腾,bio-red的太敏感,大量纯化是容易出问题。
其他的仪器就是纯化后工作,比如纯化好的蛋白保存,可能会用到冷冻干燥。
对了,还有一个,就是SDS-PAGE蛋白电泳仪,用来检测蛋白是否表达,是否完全破碎,纯化后是否有杂蛋白等等。
其他的就没有了。。
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怎样储存纯化蛋白质,4摄氏度和零下20度哪一种能长时间保存蛋白质活性?
一般来说蛋白都放在-20℃冰箱里,有必要的话甚至要放到-80摄氏度,因为你在提纯的过程中没法做到无菌,因此提纯的蛋白液里肯定共有细菌的存在。而细菌在4°C中仍然是会活动的,这样它就会去水解蛋白质,辛辛苦苦提的蛋白也就质量下降。不信你可以把蛋白放在4度里过一个星期,拿出来绝对臭了,臭了就说明降解了。
蛋白质因为其三级,四级结构复杂,一般不推荐反复冻融,这样可能极大损害蛋白活性。而且在保存时最好加入一点BSA,一般0.1%左右即可。
希望能够帮到你~有问题一起讨论解决哦~
用层析仪纯化蛋白前要过滤蛋白吗
蛋白的纯化大致分为粗分离阶段和精细纯化阶段二个阶段.一般蛋白纯化采用的方法为树脂法.粗分离阶段主要将目的蛋白和其他细胞成分如DNA、RNA等分开,由于此时样本体积大、成分杂,要求所用的树脂高容量、高流速、颗粒大、粒径分布宽.并可以迅速将蛋白与污染物分开,必要时可加入相应的保护剂(例如蛋白酶抑制剂),防止目的蛋白被降解.精细纯化阶段则需要更高的分辨率,此阶段是要把目的蛋白与那些分子量大小及理化性质接近的蛋白区分开来,要用更小的树脂颗粒以提高分辨率,常用离子交换柱和疏水柱,应用时要综合考虑树脂的选择性和柱效两个因素.
akta蛋白纯化系统维修
亲,您好! 很高兴为您解答!akta蛋白纯化系统是GE Healthcare旗下生产的分离和纯化蛋白质的生物分离设备。如果您的akta蛋白纯化系统需要维修,建议:1. 首先检查配件和系统运行状况。检查各个部件是否存在磨损、损坏或超出使用期限的情况。特别是将要更换的部件,如滤器、管道、阀门等。2. 根据问题情况制定维修方案。如果只是更换一些易损零件,可以自行更换;如果检测到控制系统、电路等存在故障,则需要专业人员维修。3. 获取相应的配件和工具。如果只需要更换易损配件,则需要提前购买新的配件,参考akta 配件目录;如果需要大规模维修,还要准备相关工具。4. 求助专业维修公司。GE官方提供akta设备维修服务,也有GE认证的第三方维修企业可以提供维修支持。5. 维修前制定计划。确定维修保障期、人员职责、配合项目等。需要尽量缩短设备停运时间。6. 维修期间要多备份数据。为防止数据丢失,建议维修前将重要数据和配置备份在外部存储介质中。7. 维修完成后进行测试。确保设备各项功能能正常运行,如流速、压力等运行参数在规格范围内。8. 维修后赋予合理使用周期和预期寿命。按使用强度合理制定下次维修周期。以上是我所了解的akta蛋白纯化系统维修的一般流程,希望能为您提供参考。如果仍有其他疑问,欢迎再提,我会尽量为您解答。【摘要】akta蛋白纯化系统维修【提问】亲,您好! 很高兴为您解答!akta蛋白纯化系统是GE Healthcare旗下生产的分离和纯化蛋白质的生物分离设备。如果您的akta蛋白纯化系统需要维修,建议:1. 首先检查配件和系统运行状况。检查各个部件是否存在磨损、损坏或超出使用期限的情况。特别是将要更换的部件,如滤器、管道、阀门等。2. 根据问题情况制定维修方案。如果只是更换一些易损零件,可以自行更换;如果检测到控制系统、电路等存在故障,则需要专业人员维修。3. 获取相应的配件和工具。如果只需要更换易损配件,则需要提前购买新的配件,参考akta 配件目录;如果需要大规模维修,还要准备相关工具。4. 求助专业维修公司。GE官方提供akta设备维修服务,也有GE认证的第三方维修企业可以提供维修支持。5. 维修前制定计划。确定维修保障期、人员职责、配合项目等。需要尽量缩短设备停运时间。6. 维修期间要多备份数据。为防止数据丢失,建议维修前将重要数据和配置备份在外部存储介质中。7. 维修完成后进行测试。确保设备各项功能能正常运行,如流速、压力等运行参数在规格范围内。8. 维修后赋予合理使用周期和预期寿命。按使用强度合理制定下次维修周期。以上是我所了解的akta蛋白纯化系统维修的一般流程,希望能为您提供参考。如果仍有其他疑问,欢迎再提,我会尽量为您解答。【回答】【提问】亲,很抱歉,您能具体的描述您的问题吗看不到高清图片?或者更换个问题,方便更准确的为您解答!【回答】我加入命令,显示器logbook那不显示我编辑的命令,也不出图【提问】如果Matlab显示器logbook中不显示你编辑的命令以及不出图,可能的原因和解决方案如下:1. 检查命令是否写错首先检查编写的Matlab命令是否有语法错误。logbook中不显示命令通常是命令有错误导致。2. 检查是否打开logbook确保在运行命令前打开logbook。可以使用logbook open命令打开一个logbook会话。3. 检查权限如果使用了其他人的logbook,需要确保你有向logbook添加命令和图像的权限。4. 清空logbook缓存Matlab有时会缓存logbook的内容,可以使用logbook purge purge来清空logbook的缓存。5. 删除logbook后重新创建如果以上方法都不工作,可以尝试删除当前logbook,然后使用logbook create重新创建。6. 重启Matlab有时Matlab会出现奇怪的bug,完全重启Matlab有时可以解决logbook不显示命令和图像的问题。7. 查看logfile日志文件在Matlab的工作目录下,有一个名为logfile.mlk的日志文件,记录了logbook的详细信息。可以查找日志中有关错误的详细信息。8. 联系MathWorks支持如果无法自己解决,可以直接联系Mathworks的技术支持部门,提供充足的问题详情以及logfile日志文件,他们可以帮助定位并修复问题。希望给出的原因和解决方案能帮助你解决Matlab logbook不显示命令以及图像的问题。如果仍有困难,欢迎继续提问,我会尽量提供有用的信息。【回答】仪器可以执行命令,但是不显示。最上边那个continue和end那栏除了Run,运行的时候其余指令也显示灰色【提问】这听起来可能是此仪器的软件存在缺陷或Bug。最可能的原因是:1. 软件本身存在缺陷。可能在设计和开发这个软件时漏洞就存在,导致部分功能无法正常工作。2. 显示驱动存在问题。仪器的显示屏和显示软件可能存在兼容性问题,导致命令无法正常显示。3. 功能是被禁用的。仪器生产商可能故意禁用了部分高级功能,禁用了对应菜单项。4. 硬件故障。例如显示屏或相关电路出现问题,导致软件命令无法正常显示。5. 软件bug。即便软件功能正常,在特定场景下可能会出现不可预料的bug,造成这种问题。一般解决方法有:1.尝试重启软件和仪器,看是否能修复。2.更新到最新版本的软件,看是否修复了此bug。3.联系生产厂商,提交问题报告。他们可能会提供补丁修复此bug。4.寻求第三方软件开发商提供的软件,功能更完善。但对于专用仪器软件,生产商提供的补丁和更新其实很有限。综上,建议多试几种方法,如果都不成事,最好的方式是联系生产厂商,反映问题并申请退换货。他们可能会提供更高版本的软件,或换一款没有此问题的同类仪器。希望所提供的信息能帮助您解决此问题。如果仍有疑惑,欢迎继续提问。【回答】好的谢谢亲【提问】我试一试【提问】
荧光定量pcr仪 stepone plus的功率是多少
荧光定量pcr仪 stepone plus的功率主频1GHz。每一种品牌,每一种型号都不一样,而且客户选择的时候都不以功率为主,看中的是性能。
我这有几种荧光定量pcr仪 stepone plus的介绍
一、供应ABI StepOnePlus实时荧光定量PCR/荧光定量PCR仪
StepOnePlus实时荧光定量PCR
StepOnePlus™实时PCR扩增仪是全球实时定量PCR技术的领导者美国应用生物系统公司继Stepone荧光定量PCR仪之后,ABI公司最新推出的快速梯度联网实时荧光定量PCR系统
· 性价比极高的4色96孔系统,可以提供高精度的实时定量PCR结果
· 基于使用寿命长的LED光学系统,可以检测FAM/SYBR Green、VIC/JOE、ROX 和NED/TAMARA染料,用于进行基因表达分析、病原体定量测定、单核苷酸多态性(SNP)基因分型以及阴阳性分析等多种实验
· 可以进行标准模式和快速模式PCR反应,快速模式可以在40分钟内完成PCR反应,极其紧凑的仪器设计,适合任何大小的实验室环境
· LCD触摸屏和支持USB存储,系统配置更灵活,并且可以实现无PC操作
· 便捷的远程监控和电子邮件通知功能,可以节省宝贵的时间
· 具有独特的VeriFlex加热模块,可分为六个独立控制的Peltier加热块,极大地提高了系统梯度功能和温控的精度
2.美国应用生物系统公司StepOneTM实时PCR扩增仪
●高效益的Stepone 3色/48孔反应板或者Stepone Plus 4色96孔规格,提供精确的实时定量PCR结果
●LED光学系统可记录从FAM TM/SYBR® Green、VIC®/JOE TM和ROX TM染料发出的荧光信号,便于进行基因表达分析、病原体定量测定、单核苷酸多态性基因分型以及存在/不存在分析
●采用同一个加热块执行标准和快速PCR反应(不超过40分钟)
●直观、灵活的软件和向导,指导新用户轻松地完成实时PCR实验的三个简明易懂步骤
●超小型化设计的仪器箱架,适合任何实验室环境
●五种安装配置,适合不同实验室需要
●LCD触摸屏和USB驱动器,易于设置和分析
●便捷的远程监控和电子邮件通知功能,节能省宝贵时间
二、美国应用生物系统公司StepOneTM实时PCR扩增仪
美国应用生物系统公司StepOneTM实时PCR扩增仪采用用户易于使用的界面,是一种功能强大的实时PCR仪。得益于其高度灵活性和易用性,甚至连先前几乎无实时PCR经验的研究人员都完全有信心设置和操作SepOne扩增仪。此新型低通量扩增仪价格经济适中,适合于具有各种实验经验的人员使用。
从软件首页上开始,配合可选的操作向导,引导用户执行实验的各个步骤,包括样本和反应设置、热循环和荧光检测等。StepOne扩增仪甚至还可协助用户在线查询所需的实时PCR试剂。
荧光基团检测化学试剂包括基于FAMTM和VIC®染料标记的TaqMan®探针的分析试剂,提供卓越的特异性和灵敏度,便于进行实时定量检测、基因分型分析和多重反应分析
多种实时PCR应用
StepOneTM实时PCR扩增仪支持许多实时定量PCR应用,包括使用相对标准曲线和比较CT(ΔΔCT)进行相对定量测定以及使用标准曲线进行绝对定量测定的基因表达分析。此外,此扩增仪还允许对核酸进行定性、PCR扩增后检测,以进行等位基因鉴别(单核苷酸多态性基因分型)分析;及使用阳性内对照进行存在/还存在(阳性/阴性)分析。新应用包括作为独立应用的解链曲线分析,以及使用等位基因鉴别(单核甘酸多态性基因分型)应用的实时PCR扩增。
荧光检测
StepOne扩增仪中的所有样本反应孔均使用一种大功率蓝色LED照明。该LED可持续使用10年,减少了更换光源的需要。荧光发射通过电二极管上的滤光器进行检测。发射滤光器经优化可配合FAM TM/SYBR®GreenI、VIC/JOE TM和 ROX TM荧光染料使用。
软件
美国应用生物系统公司StepOne实时PCR扩增仪配备的软件在WindowsXp®操作系统上运行,并提供仪器控制、数据采集和数据分析等功能。软件采用用户易用的直观界面,包括下列功能:
*实验没计向导,帮助您设计和设置实验。
*移液方案和配方,用于快速设置实验。
*高级设置,适用于需要灵活性以便进行更复杂应用(如多重反应)的高级用户。
*快速启动设置,允许您扛即启动实验并于稍后反应板信息。
*实时监视扩增增长曲线,让您即时查看实验进程。
*远程实日寸监控,可从一台远程计算机监控实验进程。
*电子邮件通知,在实验已开始或结束时提醒您。
*自动基线和白动阈值功能令数据分析得以简化。
*自动单核苷酸多态性基因分型识别功能,具有直观的图表输出和量值分配特性。
*工具提示功能,当查看扩增曲线或单核苷酸多态性基因分型图谱时,易于识别样本反应孔。
*故障排除标记,帮助您诊断并解决实验中出现的问题。
*多图谱视图,可同时从四个透视图评估数据。
*简便的剪切和粘贴功能。
*方便地导出为PowerPoint®、Excel®格式或直接导出为jpeg文件。
表l已验证性能指标
动态范围 9个数量级的线性动态范围
灵敏度 可在单一报道基因TaqMan分析的30μL反应量中检测10份拷贝RNaseP模板
精密度 使用TaqMan®RNaseP仪器验证反应板,StepOne扩增仪可分辩5,000至
10,000个RNaseP模板拷贝(置信度99.7%)
运行时间 快速:使用TaqMan®RNaseP验证测试反应板,40循环PCR反应耗时不足40分钟;标准:40循环PCR反应耗时不足2小时
安装规格
发货前,每台StepOne扩增仪均已经过专业校准,以确保光学和热学精确度。在不足四小时安装期间,通过RNaseP仪器验证测试反应板会验证各项性能规格,以确保数据的高度精确性。
无需PC及可联网操作
StepOne扩增仪可采用五种不同配置进行安装:
1、本地协作配置(计算机控制)
2、独立运行配置(无需计算机)
3、联网配置
4、本地协作配置(局域网计算机控制)
5、扩增仪联网配合木地协作计算机配置(计算机控制)
连接至以太网能够实现远程监控及下载和上载试验文件与数据。
计算机规格
尽管StepOne扩增仪在无计算机的情况下也可执行操作(可从仪器触摸屏上通过快速启动功能启动实验运行),但StepOne扩增仪可能配备有膝上型电脑或立式计算机及USB记忆棒。
用户自行提供的计算机必须满足以下最低要求方可支持本扩增仪:
.WdindowsXP操作系统并已安装ServicePack2
.英特尔处理器,主频1GHz或更高
.最小内存容量512MB
.最小硬盘驱动器容量20GB
.CD-ROM光盘驱动器
.以太网接口适配器(网卡)(10BASE-T)
.最低分辩率达1024X1280的显示器
便捷的在线查询
为便于订购实时PCR扩增母液和塑料器皿耗材,可通过扩增仪软件中的Design Wizard(设计向导)访问实验材料清单,并直接链接到美国应用生物系统公司产品仓库(可选)。
服务与保修
购买StepOneTM实时PCR扩增仪包括—年期的免费保修(包括零件保修和维修工时)服务。
表2仪器规格
热循环系统 珀耳帜效应系统
加热块规格 48孔加热块
支持容量 10-30μL
支持耗材
·48孔 L (0.1ml)反应板与光学盖膜
·48孔 L (0.1 ml)反应板与光学平盖
·8连管 (0.1 ml)与光学平盖
·单管 (0.1 ml)与光学平盖
样本升降温速率 快速模式:+/– 2.2℃/秒 标准模式:+/–1.6℃/秒
加热块最高升降温速率 4.6℃/秒
温度范围 4℃/秒-100℃/秒
温度精确度 设定值/显示温度的土0.25℃(35℃至95℃)(时钟启动后3分钟 开始测量)
温度均一性 士0.50℃(时钟启动后30秒),温度范围35℃至95℃
解链曲线分辨率 低至0.1℃
光学系统 LED激发光源,发射滤光器、光电二极管
安装时已校正染料 FAMTM 、SYBR® Green 、VIC®、JOE®、ROX®染料
被动参照染料 ROX TM染料
数据采集 所有滤光器中收集中的所有反应孔数据(无论何种反应板设置)。试验结束后反应板设置可修改
定量PCR 快速:不超过40分钟
分析时间 标准:不超过2小时
触摸屏 LCD/6.5英寸FulI VGA(640X480)/260K色
蛋白质纯化仪
蛋白质纯化与结晶的原理 获得蛋白质的晶体结构的第一个瓶颈,就是制备大量纯化的蛋白质(>10mg),其浓度通常在10mg/ml以上,并以此为基础进行结晶条件的筛选。运用重组基因的技术,将特定基因以选殖(clone)的方式嵌入表现载体(expression vector)内,此一载体通常具有易于调控的特性。之后再将带有特定基因的载体送入可快速生长的菌体中,如大肠杆菌(Escherichia coli),在菌体快速生长的同时,也大量生产表现载体上的基因所解译出之蛋白质。一般而言纯度越高的蛋白质比较有机会形成晶体,因此纯化蛋白质的步骤就成为一个重要的决定因素。 在取得高纯度的蛋白质溶液后,接下来就是晶体的培养。蛋白质晶体与其他化合物晶体的形成类似,是在饱和溶液中慢慢产生的,每一种蛋白质养晶的条件皆有所差异,影响晶体形成的变量很多,包含化学上的变量,如酸碱度、沉淀剂种类、离子浓度、蛋白质浓度等;物理上的变数,如溶液达成过饱和状态的速率、温度等;及生化上的变数,如蛋白质所需的金属离子或抑制剂、蛋白质的聚合状态、等电点等,皆是养晶时的测试条件。截至目前为止,并无一套理论可以预测结晶的条件,所以必须不断测试各种养晶溶液的组合后,才可能得到一颗完美的单一晶体。 蛋白质晶体的培养,通常是利用气相扩散法(Vapor Diffusion Method)的原理来达成;也就是将含有高浓度的蛋白质(10~50mg/ml)溶液加入适当的溶剂,慢慢降低蛋白质的溶解度,使其接近自发性的沈淀状态时,蛋白质分子将在整齐的堆栈下形成晶体。举例来说,我们将蛋白质溶于低浓度(~1.0M)的硫酸铵溶液中,将它放置于一密闭含有高浓度(~2.0M)硫酸铵溶液的容器中,由气相平衡,可以缓慢提高蛋白质溶液中硫酸铵的浓度,进而达成结晶的目的。 蛋白质晶体在外观上与其他晶体并无明显不同之处,但在晶体的内部,却有很大的差异。一般而言,蛋白质晶体除了蛋白质分子外,其他的空间则充满约40%至60%之间的水溶液,其液态的成分不仅使晶体易碎,也容易使蛋白质分子在晶格排列上有不规则的情形出现,造成晶体处理时的困难及绕射数据上的搜集不易等缺点。但也由于高含水量的特性,让蛋白质分子在晶体内与水溶液中的状态,极为相似。所以由晶体所解出的蛋白质结构,基本上可视为自然状态下的结构。