双缩脲试剂检测蛋白质原理

时间:2023-07-06 11:26:57编辑:优化君
双缩脲检验蛋白质原理

1、双缩脲试剂检测蛋白质原理是双缩脲在碱性溶液中能与硫酸铜反应产生红紫色络合物,此反应称为双缩脲反应。

2、蛋白质分子中含有很多和双缩脲结构相似的肽键,因此也能起双缩脲反应,形成红紫色络合物。

3、双缩脲试剂本是用来检测双缩脲,由于蛋白质分子中含有很多与双缩脲结构相似的肽键,因此也能与铜离子在碱性溶液中发生双缩脲反应。

4、当底物中含有肽键时,试液中的铜与多肽配位,络合物呈紫色。

5、可通过比色法分析浓度。

6、双缩脲法测定蛋白质的优缺点:

7、优点:双缩脲法测定蛋白质的测定范围是1~10mg蛋白质,操作简单、快捷。

8、既适合手工操作,又适合自动化分析,重复性好、线性关系好,双缩脲试剂可以长期保存。

9、缺点:灵敏度差,测定范围窄,样品需要量大,不同的蛋白质产生颜色的深浅相近,因此它常用于需要快速,但并不需要十分精确的蛋白质测定。

10、干扰测定的物质包括有:在性质上是氨基酸或肽的缓冲液,如TrIs缓冲液,因为它们产生阳性呈色反应,铜离子也容易被还原,有时出现红色沉淀。

双缩脲试剂检验蛋白质的原理和条件

1、双缩脲试剂可以用于检测待测样品中蛋白质的含量。

2、配置好的双缩脲试剂和样本进行反应时,不需要什么特别的条件。

3、双缩脲试剂检测蛋白含量的原理是,蛋白质中的肽键可以在碱性环境下与铜离子发生反应,反应生成的络合物呈紫色。

4、使用分光光度计,对反应后的颜色进行鉴定,与标准品进行比对,就可以得出蛋白质的浓度。

蛋白质的双缩脲反应原理是什么

1、双缩脲试剂(biuret reagent)是由双缩脲试剂A(NaOH)和双缩脲试剂B(CuSO4)两种试剂组成.

2、双缩脲试剂A的成分是氢氧化钠的质量分数为0.1 g/mL的水溶液;

3、双缩脲试剂B的成分是硫酸铜的质量分数为0.01 g/mL的水溶液。

4、双缩脲试剂可以验证蛋白质的存在。

5、具体方法是:

6、先将双缩脲试剂A加入组织样液,振荡均匀(必须营造碱性环境),再加入双缩脲试剂B,摇荡均匀。

7、如果组织里含有蛋白质,那么会看到溶液变成紫色。

8、具有两个或两个以上肽键的化合物皆可与双缩脲试剂产生紫色反应。

9、蛋白质的肽键在碱性溶液中能与Cu2+络合成紫红色的化合物。

10、颜色深浅与蛋白质浓度成正比。

11、双缩脲(NH2CONHCONH2)是两个分子脲经180℃左右加热,放出一个分子氨后得到的产物。

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